样本的核酸检测也可以在这种环境下进行,然后送到样本P2.如何保证检测结果的准确性和实验室的安全?实验室检测
6月27日,北京新发地聚集性疫情持续16天,核酸检测成为公众关注的话题。阴性或阳性,不同的检测结果决定了一个人甚至一个家庭的喜怒哀乐,也影响了公共卫生人员后续的防控措施。
混而不乱
6月23日,晚上。
夕阳西沉,烈日余温依然烘烤着大地。与周围的喧嚣相比,北京市西城区迎新街100号的一座老建筑显得孤独而宁静。
这是中国疾控中心病毒病预防控制所(南区)的实验大楼。中国疾控中心生物安全首席专家、病毒病研究所党委书记吴桂珍说。黄祯祥、朱既明、侯云德、曾毅、洪涛五位院士相继走出五层实验楼,中国第一个生物安全三级实验室也诞生了(P3实验室)。目前,高福、侯云德等四位院士的实验室仍在这里工作。
自6月12日晚以来,我们24小时不间断地工作,协助北京完成了1.2万多个样本的核酸检测。吴桂珍说:新发地市场相关病例样本病毒的全基因组序列测定和分析也在这里完成。”
北京新发地聚集性疫情发生后,中国疾控中心共同抗疫。为了缩短咽拭子样本的运输时间,病毒病院将移动P实验室从昌平园转移到南区。
这一次,就靠它!武桂珍指着实验大楼二楼帐篷式移动P3实验室说。实验室占地面积小,约10平方米,外观与塑料温室相似。对密封性要求很高,温室比不上这些材料。武桂珍笑着说。
实验室检测,首先是安全。武桂珍强调,帐篷式移动P3.实验室采用负压环境,内部空气过滤后可排放。添加手套箱等设备后,甚至可以实现P4级别。即使是今天最危险的埃博拉病毒也可以在这种环境下进行核酸样本检测。
此外,帐篷式移动P3实验室易于拆装,在绥芬河、哈尔滨、舒兰等地的战疫中派上用场。目前工作人员只需三四个小时即可安装调试到位。
随着北京检测范围的不断扩大,对核酸检测能力的需求也急剧增加。为了提高检测效率,北京采用了混合检测的方法。虽然武汉在全市普通检查中也采用了这种方法,但公众仍担心混合检查会影响检测的准确性吗?
对此,吴桂珍表示,咽拭子样本的混检不能简单地等同于不同饮料的混合。核酸检测,检测DNA,它是一种遗传物质,它不会因为混合而改变,就像几个人聚在一起,不会改变每个人的身体特征一样。
另一方面,国内外的研究结果表明,混合检测不会影响核酸检测的准确性国外一般采用10~20个样本,国内3~5个样本。
吴桂珍说,虽然是混检,但采样时还是备份了。以三个样本混合检查为例,送到实验室的实际上是四个样本-三个单管分别有三个人的样本,另一个是混合管,混合了三个人的样本。若混管呈阳性,则应再次检测三个单管。目前,北京的样本大多是阴性的。在这种情况下,混合检查有利于提高效率和降低成本。若阳性样本较多,则不适合混检。武桂珍说。
两扇门隔开另一个世界
样本来了!随着洪亮的声音,中国疾控中心病毒病研究所肖康和刘铁柱两名实验人员手里拿着带有危险物质标志的传染性物质运输箱走了进来。
这是北京市丰台区送来的一批样本。运输箱包裹了三层,以确保安全。
帐篷式移动P3实验室主要完成清点检查、灭活等工作。然后送样本P核酸提取实验室。最后是核酸检测,确定阴性或阳性。
防护服、护目镜、两层橡胶手套,一切准备就绪,肖康、刘铁柱看压力表,-48帕,实验室处于负压状态,一切正常。对视一眼,点点头,准备进入实验室。为确保安全,进入生物安全三级实验室,必须两人同行,以便相互照顾。
实验室分为缓冲区和为缓冲区和试验区。打开第一扇门,进入缓冲区,两人在这里消毒运输箱。三层包装,每打开一层,消毒一次。消毒后,打开第二扇门进入实验区。实验人员首先要清点样品,核对样品信息,然后开始将样品放入操作台上的裂解剂逐一灭活。
取样,放入裂解剂,灭活,实验人员应不断重复此动作。虽然很无聊,但我不敢掉以轻心。一次疏漏可能会产生很大的影响。肖康说,每次从实验室出来,肩膀都疼,最严重的时候,胳膊抬不起来。
样品灭活后,由于记录数据的纸质材料无法取出,第三名工作人员应通过实验室外的塑料薄膜拍照,然后输入数据。
虽然负压环境保证了实验室的安全,但对实验者来说是一个很大的考验。武桂珍说。为了保证安全,除了防护设备外,实验人员还应佩戴便携式正压呼吸装置,过滤净化实验室内的空气,然后供实验人员呼吸
另外,负压环境会压迫耳膜,类似于飞机起落时的阶段,时间长了会产生耳鸣。再加上鼓风机本身的噪音,两名实验者在交流时必须大声喊叫,就像吵架一样,出来后耳朵嗡嗡作响。因此,在P3实验室工作时间不得超过4小时,否则会对身体造成伤害。
病毒来源国难以锁定
其次是核酸提取和核酸检测。这两步是因为样本已经灭活了P实验室可以完成。
另一组实验者将提取的核酸样品放入荧光中PCR反应试剂;然后放入离心机,使核酸尽可能沉入试管底部;最后,放入荧光定量PCR分析仪器,80分钟后,得出结果。
与公众想象的不同,测试结果并不简单。yesorno实验者需要分析数据曲线,得出结论。如果是阳性样本,我们应该为未来的追溯做好保留。武桂珍说。
吴桂珍承认,从目前的技术条件来看,核酸检测不能100%准确。一方面,要通过科学研究提高检测试剂的特异性和敏感性,同时也要加强对样品采集人员的培训,提高样品采集质量。
中国疾控中心病毒病研究所所长助理张勇表示,目前已确定新发地市场相关病例的病毒来自欧洲,但很难确定具体来自哪个国家。欧洲国家人员交流频繁,不同国家相关病例发现的病毒基因序列差异很小,很难确定具体来自哪个国家。
另一方面,张勇认为,可追溯性工作需要实验室检测和流行病学调查的合作。只有综合利用基因组流行病学、现场流行病学和大数据技术,才能揭开新病毒来源的谜团。
他说,流调和大数据可能会发现病例之间的关系,但有时无法判断谁感染了他们。通过实验室检测和基因测序分析,可以了解它们之间的传播路径。当我们推测到病毒之间可能存在的传播关系时,我们也可以通过流调等方式进一步寻找相应的证据。”
据报道,在国家重大科技项目的支持下,病毒病研究所正在率先在全国范围内建立基于病毒全基因组的病毒网络监测和可追溯性技术体系,以应对与国家安全有关的病毒可追溯性的重大问题。
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