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(5)观察DNA和RNA在细胞分布的实验中，用缓水冲洗载玻片的目的是什么？提示DNA细胞核主要分布，RNA主要分布在细胞质中。四、用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体(3)观察线粒体时，为什么选择健那绿染液进行染色，为什么不观察叶绿体呢？

高中生物实验总结

如何补充高中生物讲解:

1、用显微镜观察各种细胞

1.实验原理

(1)计算放大倍数，显微镜放大倍数等于目镜放大倍数和物镜放大倍数的乘积。

(2)放大倍数的本质:放大倍数是指放大的长度或宽度，而不是面积或体积。

(3)高倍显微镜的作用:可以放大细胞，更清晰地观察细胞的形状和结构，有利于区分不同的细胞。

2.操作步骤

[深度思

(1)如何区分目镜和物镜的长度和放大倍数？

提示目镜无螺纹，物镜有螺纹。物镜越长，放大倍数越大；目镜越长，放大倍数越小。

(2)为什么要先用低倍镜观察清楚，然后将要放大的物体图像移到视野中心，再用高倍物镜观察？

低倍镜下视野范围大，高倍镜下视野范围小。如果直接用高倍物镜观察，往往因为观察的物体图像不在视野范围内而找不到。因此，需要先用低倍镜观察清楚，将要放大的物体图像移到视野中心，然后用高倍镜观察。

(3)如何将物像移到视野中心？

提示物像在视野中偏向哪个方向，装片就向哪个方向移动，简称“偏哪移哪”。

(4)如果视野中一半暗；观察花生切片标本材料一半清晰一半模糊的可能原因是什么？

提示前者可能是反光镜调节角度不对；后者可能是由于花生切片厚度不均匀造成的。

(5)如果观察视野中有污垢，如何判断污垢的位置？

提示：

[方法技巧]

1.关注使用显微镜的4容易出错

(1)必须先用低倍物镜观察，找到要观察的物像，移到视野中心，然后换成高倍物镜。

(2)换成高倍物镜后，粗准焦螺旋不能再旋转，只能用细准焦螺旋调节。

(3)用高倍物镜代替后，如果视野太暗，首先调整遮器(更换大光圈)或反射器(使用凹面反射器)使视野明亮，然后调整精细的焦螺旋。

(4)观察颜色较深的材料，视野要适当调亮，否则要适当调暗。

2.显微镜下细胞数的两种计算方法

若视野中的细胞为单行，计算时只考虑长度和宽度；若视野中充满细胞，计算时则要考虑面积的变化。

(1)如果视野中有一行细胞，高倍镜下细胞数与低倍镜下细胞数之比等于放大倍数之比的倒数。

(2)如果视野中充满细胞，则高倍镜下细胞数与低倍镜下细胞数之比等于放大倍数之比的倒数平方。

2.检测生物组织中的糖、脂肪和蛋白质

2.实验步骤

(1)上述实验选材的标准是什么？

提示①被检测物质含量丰富；②材料接近无色；③易取材、易操作等。

(2)为什么在添加相应试剂之前要留出一些组织样液？

提示作为对比，以比较鉴定后样液的颜色，增强实验的说服力。

(3)为什么还原糖使用的斐林试剂要现配现用？

提示由于斐林试剂不稳定，容易产生蓝色Cu(OH)2沉淀，应分别保存甲液和乙液，使用时现配现用。

(4)在蔗糖溶液中加入斐林试剂后呈现什么颜色？

提示蔗糖为非还原糖，不与斐林试剂发生颜色反应。观察到的现象不是无色的，而是蓝色的[Cu(OH)2的颜色]。

(5)为什么在使用双缩脲试剂时要先添加试剂？A，后加入试剂B?

提示先添加试剂A，只有在碱性环境中，蛋白质才容易产生碱性环境Cu2+颜色反应。

(6)鉴定蛋白质时，如果添加试剂B后没有紫色反应，可能的原因是什么？

提示可能添加的双缩脲试剂B过量，CuSO在碱性溶液中产生大量蓝色Cu(OH)絮凝沉淀会阻挡实验中产生的紫色，影响观察结果。

为什么在脂肪鉴定实验中用50%的酒精洗去浮色而不用清水？

因为苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ易溶于有机溶剂酒精，不溶于清水。

[技术提炼]

1.用一起三不同来区分斐林试剂和双缩脲试剂

一起是指都含有NaOH和CuSO和NaOH溶液的质量浓度为0.1g/mL。

“三不同”分别指：(1)使用原理不同。斐林试剂的本质是新准备的Cu(OH)2溶液，双缩脲试剂的本质是碱性环境Cu2＋。

(2)使用方法不同。鉴定还原糖时，立即混合甲、乙液等量；鉴定蛋白质时，先加A液1mL摇匀，然后加4滴B液，摇匀。

(3)CuSO溶液浓度不同。斐林试剂中CuSO溶液的质量浓度为0.05g/mL，在双缩脲试剂中CuSO溶液的质量浓度为0.01

2.三类有机物检测在操作步骤上的差异

(1)唯一需要加热-还原糖检测，水浴必须加热，酒精灯不能直接加热。若不加热，则无砖红色沉淀。

(2)只需要显微镜-脂肪检测。

(3)混合后加入斐林试剂；分别加入-双缩脲试剂(先加A液，再加B液，B液不能过量)。

三、观察DNA和RNA细胞分布

(1)甲基绿和吡罗红DNA和RNA不同的亲和力:甲基绿+DNA→绿色；吡罗红+RNA→红色。

(2)盐酸可以改变细胞膜的渗透性，加速染色剂进入细胞，使染色质量DNA有利于与蛋白质分离DNA结合染色剂。

(1)为什么不选择紫洋葱外表皮细胞或叶肉细胞进行实验选材？

提示紫洋葱表皮细胞含有紫色液泡，叶肉细胞含有叶绿体，容易干扰实验结果。

(2)哺乳动物成熟红细胞不能观察DNA和RNA分布的原因是什么？

哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核，没有细胞核DNA。

(3)为什么滴加0在制作时？.9%的NaCl溶液？

提示0.9%的NaCl溶液能保持口腔上皮细胞的正常形态。

(4)为什么在水解前用酒精灯烘干载玻片？

提示干燥可以快速杀死和固定细胞，否则细胞中的溶酶会破坏核酸。

(5)观察DNA和RNA在细胞分布的实验中，用缓水冲洗载玻片的目的是什么？

提示防止细胞被水冲走。

(6)上述实验得出的实验结论是什么？

提示DNA细胞核主要分布，RNA主要分布在细胞质中。

[易错警示]

观察DNA和RNA细胞分布实验的注意事项

(1)吡罗红甲基绿色染色剂:混合使用，现配。

(2)DNA和RNA它分布在细胞核和细胞质中，但数量不同，因此结构强调主要，而不是只存在于细胞核或细胞质中。

四、用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体

(1)叶绿体呈绿色、扁平的椭球形或球形，制作后直接观察，无需染色。

(2)线粒体无色，有短棒、圆球、线、哑铃等。，用健那绿染液染成蓝绿色后制作观察。

(1)观察叶绿体

(2)观察线粒体

(1)观察叶绿体时，为什么常用苔藓叶？

提示苔藓叶片很薄，只有一两层叶肉细胞，可直接用于制作临时装片。

(2)选择菠菜叶作为观察叶绿体的材料，为什么要撕掉带少许叶肉的下表皮？

提示叶绿体主要分布在叶肉细胞中，叶表皮无叶绿体，海绵组织靠近下表皮，细胞排列松散，易撕裂。

(3)观察线粒体时，为什么选择健那绿染液进行染色，为什么叶绿体不需要染色？

提示健那绿是专门用于线粒体染色的活细胞染料，染色后不影响细胞的生命活动；叶绿体本身含有色素，无需染色即可观察。

(4)临时装片中的材料在观察叶绿体时随时保持水分状态的原因是什么？

提示保持水状态，以确保叶绿体的正常形态，并悬浮在细胞质基质中。否则，细胞失水收缩会影响叶绿体形态的观察。

5误区走出叶绿体和线粒体观察实验

(1)观察线粒体应选择人体或动物细胞或植物体无色细胞，而不是绿色组织细胞。

(2)观察线粒体和叶绿体应保持细胞活性。

(3)观察叶绿体时，叶片应保持水分状态，防止失水。

(4)制作观察线粒体的临时装片时，是滴一滴健那绿染液于载玻片中央用于染色，而不是滴一滴生理盐水。

（5）叶绿体不仅随细胞质的流动而流动，而且随着光线方向的变化而旋转。一般来说，叶绿体面向光源，以便接受更多的光。

观察植物细胞质壁的分离和恢复

(1)成熟植物细胞的原生质层相当于半透膜。

(2)细胞液具有一定的浓度，能渗透吸水和失水。

(3)原生质层比细胞壁的伸缩性大得多。

(1)实验时一定要选择紫洋葱鳞片叶外表皮细胞吗？

提示不一定。但紫洋葱鳞片叶外表皮细胞的细胞液含有色素，使液泡呈紫色，更有利于观察。

(2)为何选择紫洋葱鳞片叶的外表皮？根尖分生区的细胞能作为实验的材料吗？

提示紫洋葱鳞片叶表皮有紫色大液泡，易于观察；根尖分生区细胞无大液泡，无质壁分离，不能作为实验材料。

(3)为什么选择0.3g/mL蔗糖溶液不需要0.5g/mL蔗糖溶液？

提示使用高浓度的蔗糖溶液(0.5g/mL)，由于溶液浓度过高，细胞失水过多，质壁分离现象明显，但无法恢复。

(4)适合浓度KNO溶液或尿素、甘油、乙二醇等可作为实验试剂吗？为什么？盐酸、酒精、醋酸等。为什么？

提示K＋和NO3

它可以被细胞吸收，从而增加细胞液的浓度。因此，细胞在质壁分离后自动恢复，不适合作为试剂（尿素、甘油、乙二醇等）。盐酸、酒精和醋酸可以杀死细胞，而不是质壁分离试验的试剂。

(5)为什么这个实验没有独立的对照组称为对照实验？

在实验中，实验组和对照组先后在同一装片中进行，属于自身对照。

[归纳整合]

1.关于细胞质壁分离和复原实验的注意点

(1)本实验有两组对照实验

(2)质壁分离的两个原因

(3)本实验是教材中唯一一个只在低倍镜下观察(从未改变高倍镜)的实验。

2.扩展应用植物细胞质壁分离和质壁分离恢复

(1)判断成熟植物细胞是活细胞还是死细胞

(2)确定细胞液浓度范围

(3)不同成熟植物细胞的细胞液浓度

(4)识别不同类型的溶液(如KNO3、蔗糖溶液)

探讨影响酶活性的因素

(1)探讨温度对酶活性的影响

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①反应原理：淀粉淀粉酶――→麦芽糖

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碘↓液碘↓液

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蓝色无蓝色出现

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②鉴定原理：温度影响酶的活性，从而影响淀粉的水解，滴加碘液，根据是否出现蓝色及蓝色的深浅来判断酶的活性。

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